北京重組蛋白內(nèi)毒素檢測(cè)法規(guī)要求
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發(fā)布時(shí)間:2025-10-08
SHENTEK®重組級(jí)聯(lián)試劑為內(nèi)毒素檢測(cè)高效解決方案。法規(guī)層面,符合美國(guó)藥典(USP)、歐洲藥典(EP)及日本藥典(JP)要求,滿足國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)需求。抗干擾性強(qiáng),與天然鱟具有相同反應(yīng)機(jī)制,檢測(cè)結(jié)果等效,適配復(fù)雜樣本場(chǎng)景。特異性表現(xiàn)突出,不含 G 因子,避免與 β - D 葡聚糖反應(yīng)產(chǎn)生假陽(yáng)性,保障結(jié)果可靠。檢測(cè)靈敏度高,線性范圍達(dá) 0.005 - 5EU/mL ,可準(zhǔn)確捕捉低濃度內(nèi)毒素。反應(yīng)快速,60分鐘內(nèi)即可完成檢測(cè),提升檢測(cè)效率。兼容性佳,能兼容動(dòng)態(tài)顯色法的酶標(biāo)儀,無(wú)需額外投入設(shè)備成本。關(guān)鍵的是,無(wú)動(dòng)物源試劑,遵循 3R 原則(減少、替代、優(yōu)化),不依賴鱟血,解決資源依賴問(wèn)題,實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定供應(yīng)。且通過(guò)重組表達(dá)生產(chǎn),批次差異小,重復(fù)性好,穩(wěn)定性高,為生物制品、制藥等行業(yè)內(nèi)毒素檢測(cè)提供可靠、可持續(xù)的工具,助力企業(yè)把控質(zhì)量,契合綠色環(huán)保與高效檢測(cè)的雙重需求,在保障檢測(cè)準(zhǔn)確性與合規(guī)性的同時(shí),推動(dòng)行業(yè)向更環(huán)保、更高效方向發(fā)展。
細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)中,rCR 加標(biāo)回收率穩(wěn)定在 50%-200% 藥典范圍,可準(zhǔn)確完成檢測(cè)。北京重組蛋白內(nèi)毒素檢測(cè)法規(guī)要求
重組級(jí)聯(lián)試劑作為內(nèi)毒素檢測(cè)鱟試劑的理想替代方案,其具備的優(yōu)勢(shì)有:①優(yōu)化的G因子級(jí)聯(lián)反應(yīng),無(wú)G因子旁路干擾。采用基因重組技術(shù)表達(dá)鱟血細(xì)胞中的C因子(Factor C)、B因子(Factor B)和凝固酶原(Proclotting enzyme),無(wú)G因子旁路干擾,排除1,3-β-D葡聚糖假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)。②依然采用動(dòng)態(tài)顯色法原理,可沿用天然鱟試劑檢測(cè)設(shè)備。重組級(jí)聯(lián)試劑(rCR),與天然鱟(動(dòng)態(tài)顯色法)具有相同的操作流程、檢測(cè)設(shè)備、分析方法,用戶可以沿用天然鱟的儀器、軟件、耗材、人員培訓(xùn)、驗(yàn)收程序等,無(wú)需投入額外成本。③具有與天然鱟的相同反應(yīng)機(jī)制,檢測(cè)結(jié)果具有等效性。完全模擬了天然鱟試劑的酶聯(lián)反應(yīng),由3種蛋白組成的級(jí)聯(lián)反應(yīng)機(jī)制提供了信號(hào)放大的過(guò)程,確保了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度。湖州申科按照藥典要求進(jìn)行替代方法驗(yàn)證,無(wú)縫銜接技術(shù)轉(zhuǎn)移,助力用戶從方法驗(yàn)證到工藝落地,從數(shù)據(jù)合規(guī)到全球申報(bào)。
廣東內(nèi)毒素檢測(cè)鱟試劑內(nèi)毒素干擾試驗(yàn)回收率需在 50%-200%,驗(yàn)證樣品基質(zhì)不影響內(nèi)毒素檢出。
湖州申科生物細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(CSE)源自大腸桿菌(E.coli O111:B4),經(jīng)過(guò)提取精制獲得脂多糖,并以細(xì)菌內(nèi)毒素國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品為基準(zhǔn)標(biāo)定效價(jià),每支效價(jià)處于 10 - 100EU ,量值準(zhǔn)確且可靠。在工業(yè)內(nèi)毒素檢測(cè)中,該標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用廣且關(guān)鍵。首先,能用于鱟試劑靈敏度復(fù)核實(shí)驗(yàn),幫助檢測(cè)人員準(zhǔn)確確認(rèn)鱟試劑對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素的敏感程度,保障檢測(cè)方法的有效性;其次,可開展干擾試驗(yàn),評(píng)估樣品中可能存在的干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,以便優(yōu)化檢測(cè)流程和方法;再者,能充當(dāng)各種陽(yáng)性對(duì)照,為檢測(cè)過(guò)程提供參照,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。這款標(biāo)準(zhǔn)品不僅適用于凝膠法鱟試劑系列實(shí)驗(yàn),在光度法鱟試劑系列實(shí)驗(yàn)中同樣能發(fā)揮重要作用。使用時(shí),只需參照中國(guó)藥典2025版第四部通則 1143 的相關(guān)介紹進(jìn)行操作即可。憑借效價(jià)標(biāo)定準(zhǔn)確和適用性的優(yōu)勢(shì),該標(biāo)準(zhǔn)品為生物制品、化學(xué)藥品等各類樣品的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)提供了穩(wěn)定且可靠的標(biāo)準(zhǔn),助力企業(yè)和檢測(cè)機(jī)構(gòu)嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,滿足法規(guī)要求。
在進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí),干擾試驗(yàn)又叫增強(qiáng)或抑制試驗(yàn),主要目的是確證檢測(cè)內(nèi)毒素的方法是否受樣品干擾。在建立細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法中,驗(yàn)證試驗(yàn)前,要去除樣品可能含有的內(nèi)毒素,以確保建立方法的準(zhǔn)確可靠。藥典規(guī)定:①當(dāng)進(jìn)行新藥的內(nèi)毒素檢查試驗(yàn)前,或無(wú)內(nèi)毒素檢查項(xiàng)品種建立內(nèi)毒素檢查法時(shí),需進(jìn)行干擾試驗(yàn);②當(dāng)鱟試劑、供試品的配方、生產(chǎn)工藝改變,或試驗(yàn)環(huán)境下發(fā)生了任何有可能影響試驗(yàn)結(jié)果的變化時(shí),需重新進(jìn)行干擾試驗(yàn)。生產(chǎn)廠家常發(fā)生的一些微小變更,會(huì)影響到評(píng)估結(jié)果,進(jìn)而影響到供試品對(duì)鱟試劑的干擾試驗(yàn)。因此,生產(chǎn)廠家應(yīng)制定一個(gè)重復(fù)進(jìn)行干擾試驗(yàn)的周期,并進(jìn)行跟蹤和記錄。
細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)中,rCR 對(duì)高蛋白(如單抗、FBS)、細(xì)胞培養(yǎng)上清等特殊樣本適配性好。
針對(duì)單核細(xì)胞活化反應(yīng)測(cè)定法(MAT)通過(guò)檢測(cè)內(nèi)毒素的生物活性,有效規(guī)避低內(nèi)毒素回收(LER)對(duì)內(nèi)毒素檢測(cè)的影響。其原理是:熱原(包括被掩蔽的 LPS)活化單核細(xì)胞表面的 TLR 受體,釋放 IL-6 等細(xì)胞因子,通過(guò) ELISA 檢測(cè) IL-6 濃度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線推算熱原含量。即使 LPS 因 LER 改變超分子結(jié)構(gòu),只要仍具生物活性,就能被 MAT 法識(shí)別。這種 “檢測(cè)活性而非結(jié)構(gòu)” 的特性,使 MAT 法成為 LER 場(chǎng)景下內(nèi)毒素檢測(cè)的重要補(bǔ)充,與其他方法協(xié)同構(gòu)建高效可靠的熱原防控體系。
塑料器皿對(duì)內(nèi)毒素吸附力強(qiáng),制備內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(CSE)稀釋液建議用硼硅酸鹽玻璃管。細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)合規(guī)申報(bào)
鱟試劑含多種酶和輔助因子,批次間活性差異可能導(dǎo)致內(nèi)毒素檢測(cè)結(jié)果變異性。北京重組蛋白內(nèi)毒素檢測(cè)法規(guī)要求
湖州申科重組級(jí)聯(lián)試劑(rCR)在關(guān)鍵性能指標(biāo)上表現(xiàn)優(yōu)異,滿足內(nèi)毒素檢測(cè)的嚴(yán)苛要求。靈敏度方面,其檢測(cè)范圍覆蓋 0.005-5EU/mL,可準(zhǔn)確捕捉微量?jī)?nèi)毒素殘留,適配基因治療、血液制品等低限值需求場(chǎng)景。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好,R2≥0.990,確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。反應(yīng)效率上,rCR 只需 60 分鐘即可完成檢測(cè),較部分競(jìng)品的 90-120 分鐘大幅縮短,提升檢測(cè)周轉(zhuǎn)效率??垢蓴_性實(shí)驗(yàn)顯示,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)輔料、300g/L 葡萄糖、FBS 血清、單抗等 8 類復(fù)雜樣品,rCR 在較低稀釋倍數(shù)下加標(biāo)回收率可達(dá) 70%-175.4%,優(yōu)于重組 C 因子法。批間一致性方面,多批次試劑檢測(cè)同一樣品的 CV 值≤15%,穩(wěn)定性遠(yuǎn)超行業(yè)平均水平,為長(zhǎng)期質(zhì)控提供可靠保障。
北京重組蛋白內(nèi)毒素檢測(cè)法規(guī)要求