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來源: 發布時間:2025-08-19

脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷腸道。進針的動作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進行組織病理學檢查。【檢測】肝組織有無:1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細胞浸潤;4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無該項病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動物的各項病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。裸鼠皮下成瘤:前肢近腋后皮下注射細胞懸液; 裸鼠原位瘤:胰腺成瘤;尾靜脈注射成瘤。寧夏小鼠動物模型培養

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結果發現在這些組織中,gm20541均有表達,說明該基因可能在體內發揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測gm20541基因在不同組織中的表達。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結束后,根據需要,裁剪適當大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉膜2h。(6)轉膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說明書)稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據一抗來源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過氧化氫酶(hrp)標記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發光試劑盒檢測蛋白。西藏大鼠動物模型服務可以簡化實驗操作和樣品收集。

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或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下,由語句“包括一個……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設備中還存在另外的相同要素。以下結合實施例對本實用新型的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例1本實用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環境模擬系統,包括功能設備集成底座1和設置在功能設備集成底座1上的飼養倉2,所述飼養倉2具有無極調控微負壓裝置、高原低氧環境模擬裝置、高原光照環境模擬裝置15、高原溫度環境模擬裝置16、高原濕度環境模擬裝置17、動物行為學遠程觀察單元18,所述飼養倉2內設置有若干代謝籠3,飼養倉2前后箱體上設置有觀察窗4和若干操作窗5,飼養倉2左右箱體上分別設置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,所述代謝籠3還包括設置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實施例的工作原理:本裝置的各個功能均通過設置在飼養倉2上的功能控制面板19控制,本裝置外形采用304不銹鋼,具有良好的氣密性。實驗動物送入飼養倉2內部后,關閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,通過功能控制面板19實現飼養倉2內部環境模擬。

基因/蛋白質表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中,保持核酸和蛋白質的完整性至關重要,因此在取樣過程中,應盡量避免核酸及蛋白質的降解。如不注意采樣過程,將會導致樣本中的核酸及蛋白質的無差別降解,嚴重影響后續分子檢測結果。在條件允許的情況下,組織樣本在離體后應立刻裝入凍存管內,并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中,可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的抑制。針對蛋白質提取樣本的保存,我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印跡(Westernblotting,WB),這兩種實驗手段是分子生物學檢測中不可或缺的一部分,也是發表論文至關重要的分子檢測數據。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉錄層面的變化進行定性或定量檢測,而WB則主要用來對某一蛋白質的表達進行定量檢測。(4)轉錄組學、蛋白質組學及代謝組學檢測隨著檢測水平及相關產業的不斷發展,各類組學檢測的價格降低,實驗設計中也常常運用組學檢測來提升實驗設計的檔次。在我們進行轉錄組學及蛋白質組學的檢測過程中,同樣是要首先確保目標RNA或蛋白質的片段完整性。好的動物模型能夠較好地模擬疾病狀態,為的研究提供可能。

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皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型一、服務信息1、動物模型名稱:皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環境:SPF級二、服務項目服務編號服務內容服務周期價錢DH2025皮膚淺II°及深II°燙傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據體重腹部備皮,然后固定于實驗臺上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時,取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開始計時。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深II°燙傷。2、檢測標準:a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發紅、輕微水腫。愈合后毛發生長良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發白、水腫。愈合后毛發生長良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細胞明顯腫脹、變性,層次結構尚清楚,細胞核結構不清;致傷10s大鼠表皮細胞部分脫落,結構不清,明顯變性、壞死,部分細胞已溶解。三、交付標準:1.提供動物模型構建過程中的原始實驗記錄及數據圖片。由于卵巢早衰的病因多種多樣,如自身免疫功能異常、遺傳因素、代謝因素、化療、放療及等。寧夏皮下成瘤動物模型造模

臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來。寧夏小鼠動物模型培養

根據gm20541的cdna序列設計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3;(g)以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳。結果見圖4中b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網膜中表達量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對照,sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠;gm20541rnalevel是指rna表達水平相對變化,以野生型表達水平為1。實施例3對4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進行erg視力檢測:1暗適應動物應整夜暗適應,環境應做到沒有光線;2次日麻醉:稱重,腹腔內注射;宜深度麻醉;3動物固定及散瞳:麻醉完成后,在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動物試驗平臺的前方:需保證小鼠正"趴",即相對于閃光刺激器的刺激口,雙眼高度一致,充分暴露,滴加散瞳劑。4電極安裝:將視網膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預熱后,在耳夾電極涂上導電膏,夾尾巴,插入放大器“地”接口;雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間),同時接兩個通道的“負”接口;金環電極夾在動物實驗平臺的電極支架上,仔細調整其角度。寧夏小鼠動物模型培養

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