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40mmnaoh,),并在金屬浴100℃加熱1h;(3)取出離心管,冷卻至室溫后,加入100μl的中和液(40mmtris-hcl,),10000g離心2min后,取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴(kuò)增:按照如系配置pcr反應(yīng)體系2×taqmix:10μl尾巴組織裂解液:2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward):1μl(濃度:10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse):1μl(濃度:10mm)ddh2o:6μl。引物序列如下:gm20541-loxp-forward序列:5’-attccccttcaagatagctac-3’;gm20541-loxp-reverse序列:5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’;six3-cre-forward序列:5’-gccgccgggatcactctcg-3’;six3-cre-reverse序列:5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴(kuò)增程序:pcr反應(yīng)體系配制完后,在pcr儀上于95℃預(yù)加熱5分鐘使模板dna充分變性,然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。在每一個循環(huán)中,先于95℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復(fù)性溫度58℃,保持30秒,使引物與模板充分退火;在72℃保持30秒,使引物在模板上延伸,合成dna,完成一個循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25次,使擴(kuò)增的dn段大量累積。,在72℃保持5分鐘,使產(chǎn)物延伸完整,4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。骨質(zhì)疏松癥是目前世界上發(fā)病率、死亡率和醫(yī)療保健消耗較大的疾病之一,已成為全世界范圍的嚴(yán)重的社會問題。北京外包動物模型技術(shù)
放血致失血性貧血小鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2014放血致失血性貧血小鼠模型3個工作日詢價1、實驗方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過眼眶靜脈叢放血,,并測外周血紅細(xì)胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢檢測外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):模型組小鼠放血后24小時的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對照組比較具**性差異(P<),表明成功構(gòu)建了失血性貧血動物模型造模。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。西藏哪里有動物模型培養(yǎng)可以嚴(yán)格控制實驗條件,增強實驗材料的可比性。
酒精性肝病(AH)大鼠模型建模方法【方法】1、正常組大鼠自由飲水。2、酒精性脂肪肝(alcoholicfattyliverdisease,AFL)模型組大鼠自由飲用酒精飲料,其酒精濃度從5%開始,每個濃度維持一周,依次改為10%、15%、20%、25%、30%、35%至40%,以40%濃度持續(xù)至12周。3、在實驗過程中,各組大鼠均給以普通顆粒飼料,共持續(xù)為12周。4、第12,動物禁食12h,稱重,下腔靜脈取血處死,血液離心取上清備用。【檢測】1、生化指標(biāo)檢測檢測ALT、AST、TC、TG、FFA、LDL-C、HDL-C和血糖的含量。2、組織病理學(xué)酒精性脂肪肝模型組大鼠肝臟體積增大,明顯腫脹,包膜緊張,邊緣圓鈍,呈奶黃色,切面油膩,腹腔內(nèi)尤以有腹膜后脂肪堆積明顯。HE染色顯示,正常組肝臟內(nèi)無明顯脂肪變性,肝小葉結(jié)構(gòu)正常,肝細(xì)胞索圍繞靜脈呈放射排列。模型組肝臟彌漫大量脂肪變性,細(xì)胞體積增大,呈氣球樣變。3、標(biāo)志因子水平ELISA法測定血清中TNF-α和ApoB的含量。
17-高原濕度環(huán)境模擬裝置,18-動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元,19-功能控制面板。具體實施方式為了使本實用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白,以下結(jié)合附圖及實施例,對本實用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實施例用以解釋本實用新型,并不用于限定本實用新型,即所描述的實施例是本實用新型一部分實施例,而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設(shè)計。因此,以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本實用新型的范圍,而是表示本實用新型的選定實施例。基于本實用新型的實施例,本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本實用新型保護(hù)的范圍。需要說明的是,術(shù)語“”和“第二”等之類的關(guān)系術(shù)語用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區(qū)分開來,而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關(guān)系或者順序。而且,術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設(shè)備不包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素。可提供專業(yè)的大鼠小鼠動物疾病模型技術(shù),包含心血管系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、生殖、泌尿系統(tǒng)、成瘤系統(tǒng)等。
brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計結(jié)果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達(dá);d:圖1中c的統(tǒng)計結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴(kuò)增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴(kuò)增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴(kuò)增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達(dá);sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果;圖中:a-c:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計。小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。湖南哪里有動物模型飼養(yǎng)
SD大鼠腦缺血模型建立。北京外包動物模型技術(shù)
用一次定量放血法可擺分之?dāng)[造成出血性休克,擺分之?dāng)[死亡,這就符合可重復(fù)性和達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)化要求。(三)可靠性復(fù)制的動物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病,即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化,應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗或X線照片、心電圖、病理切片等證實。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動物,就不應(yīng)加以選用,易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。(四)適用性和可控性供醫(yī)學(xué)實驗研究用的動物模型,在復(fù)制時,應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利于研究的開展。(五)易行性和經(jīng)濟(jì)性在復(fù)制動物模型時,所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)條件原則。以上就是上海研錄為你分享的小知識,如果想要了解更多相關(guān)內(nèi)容,可與我們聯(lián)系,我們期待您的來電!北京外包動物模型技術(shù)