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寧夏C57原代細胞構(gòu)建

來源: 發(fā)布時間:2025-10-11

導語對于大部分科研人員來說,研究中一般用到均是現(xiàn)成的細胞系/株,我們只需要:進行細胞傳代和保種。然而,這些細胞系常常由于體外長期培養(yǎng),而丟失原有生物學特性,對藥物處理的反應差距越來越大。因此,原代細胞的地位日漸凸顯,Paper中若有了原代細胞的數(shù)據(jù)都會添色不少。然而,就小編親生經(jīng)歷,原代細胞分離著實是個技術(shù)活,我們就結(jié)合自身經(jīng)驗,為大家介紹:組織和正常組織的原代細胞的分離與培養(yǎng)方法。部分:原代細胞的基本知識1.什么是原代細胞培養(yǎng)?原代細胞(Primarycells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指:組織、外周血及胚胎等。原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。2.原代細胞與細胞系(celllines)的區(qū)別原代細胞和細胞系的比較:PrimarycellsCelllines增殖能力較弱強繁殖代數(shù)一般只能傳10代以內(nèi)無限增殖,50代左右遺傳物質(zhì)完整性遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)發(fā)生改變生物特性接近臨床樣本偏離臨床樣本培養(yǎng)容易程度比較復雜簡單。骨骼肌的一般形態(tài)特征肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。寧夏C57原代細胞構(gòu)建

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具體實施方式以下結(jié)合附圖和具體實施例,對本實用新型進行詳細說明。如圖1至圖5所示,一種新型原代細胞培養(yǎng)箱,包括若干個用于存放細胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒2、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體1,所述外箱體1內(nèi)設有若干列中空的矩形槽11,各所述矩形槽11的兩側(cè)分別設有若干層對稱的滑槽111,若干層所述滑槽111由上至下等間距依次設置,每一層所述滑槽111的正面及背面各存設有一內(nèi)箱盒2,所述內(nèi)箱盒2包括底盒21、紫外燈23及上蓋22,所述紫外燈23設于底盒21內(nèi),所述底盒21與上蓋22的一側(cè)通過合頁鉸接,所述底盒21與上蓋22的另一側(cè)通過鎖扣24扣合連接,所述底盒21上設有推拉把手25,所述底盒21的兩側(cè)分別設有與滑槽111適配的滑輪211,所述底盒21兩側(cè)的頭部分別設有與滑槽111適配的滑塊212。如圖1至圖3所示,內(nèi)箱盒2內(nèi)可存放細胞的培養(yǎng)皿,外箱體1的正面及背面均可存放內(nèi)箱盒2,正背兩面可同時存放內(nèi)箱盒2的設計,提高了細胞培養(yǎng)箱的空間利用率,使得細胞培養(yǎng)箱在同一占地面積的情況下可存儲更多的細胞培養(yǎng)皿。存放時,只需將內(nèi)箱盒2的滑輪211對準滑槽111,手持在底盒21上的推拉把手25,通過滑輪211滑動的方式,將內(nèi)箱盒2推送至滑槽111內(nèi)。湖北豚鼠原代細胞實驗室當細胞融合度達到90%以上時,給細胞傳代。

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本發(fā)明采用活塞式推進桿外加正壓式肝素帽設計,增強了瓶身的一體性,減少了污染的可能性,且通過注射器注水的方式可以自行控制纖維板和培養(yǎng)瓶底部的接觸程度,使得操作流程更可控。附圖說明圖1是本發(fā)明的整體結(jié)構(gòu)示意圖。圖2是本發(fā)明的縱向剖面結(jié)構(gòu)示意圖。圖中標記為:1-外接圓柱;2-正壓口;3-阻隔環(huán);4-彈簧;5-連接桿;6-加樣口;7-爬片瓶頸;8-纖維板;9-瓶底;10-直角三角支架;11-活動圓盤;12-纖維圓盤;13-瓶身。具體實施方式下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。如圖1和2所示,一種一體式原代細胞爬片培養(yǎng)瓶,包括瓶身13,所述瓶身13的其中一側(cè)端部設有爬片瓶頸7和加樣口6,瓶身13的上端部設有外接圓柱,所述外接圓柱1的頂端封閉、下端與瓶身13連通,并且外接圓柱1內(nèi)設有活動圓盤11和纖維圓盤12,所述活動圓盤11位于纖維圓盤12的上方,活動圓盤11的四周外壁與外接圓柱1的內(nèi)壁可滑動接觸,并且在外接圓柱1內(nèi)壁上設有用于限制活動圓盤11向上活動的阻隔環(huán)3,同時在外接圓柱1位于活動圓盤11上方的柱體上設有正壓口2,所述纖維圓盤12固定設置,并且在纖維圓盤12內(nèi)可活動穿插有連接桿5,所述連接桿5上端與活動圓盤11固定連接。

所述鎖環(huán)套設于鎖塊上。采用上述各個技術(shù)方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述外箱體的底部還設有若干萬向腳輪。采用上述各個技術(shù)方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述外箱體的側(cè)部還設有方便推拉的扶手。采用上述各個技術(shù)方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述外箱體內(nèi)設有3列中空的矩形槽,各所述矩形槽的兩側(cè)分別設有15層對稱的滑槽。采用上述各個技術(shù)方案,本實用新型通過將細胞培養(yǎng)皿存放在內(nèi)箱盒內(nèi),在外箱體的矩形槽設置若干層對稱的滑槽,各內(nèi)箱盒可從滑槽的正面或背面存放于內(nèi),提高了細胞培養(yǎng)箱的空間利用率;在內(nèi)箱盒內(nèi)設有紫外燈,紫外燈單獨照射于內(nèi)箱盒,使得細胞培養(yǎng)皿處于無菌無毒的環(huán)境,提高細胞培養(yǎng)的存活率;在內(nèi)箱盒的兩側(cè)分別設有滑輪及滑塊,滑輪的設置使得用戶可方便存取內(nèi)箱盒內(nèi)的細胞培養(yǎng)皿,滑塊的設置使得內(nèi)箱盒在處于存放狀態(tài)時更加穩(wěn)固,防止內(nèi)箱盒滑脫至外;整體結(jié)構(gòu)簡單、存儲方便,可推廣使用。附圖說明圖1為本實用新型的正面立體結(jié)構(gòu)示意圖;圖2為本實用新型的背面立體結(jié)構(gòu)示意圖;圖3為本實用新型的外箱體結(jié)構(gòu)示意圖;圖4為本實用新型的內(nèi)箱盒閉合狀態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖;圖5為本實用新型的內(nèi)箱盒打開狀態(tài)結(jié)構(gòu)示意圖。干細胞的誘導分化一方面是干細胞鑒定的主要方法。

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下端伸入瓶身并與設于瓶身內(nèi)的纖維板固定連接,并且在活動圓盤和纖維圓盤之間的連接桿上套裝有彈簧。進一步的,所述活動圓盤的四周設有密封圈。進一步的,所述彈簧處于自然狀態(tài)或輕微壓縮狀態(tài)時,活動圓盤與阻隔環(huán)相接觸。進一步的,所述纖維板采用具有阻隔和透氣特性的柔性網(wǎng)格纖維材料制作。進一步的,所述外接圓柱的直徑為2cm,所述正壓口的直徑為5mm,并可采用肝素帽封閉。進一步的,所述活動圓盤和纖維圓盤的直徑為。進一步的,所述加樣口為直徑,該開口可通過螺紋連接透氣瓶蓋。進一步的,所述瓶身底部的四個角設置有8個直角三角支架。本發(fā)明的有益效果如下:本發(fā)明可以根據(jù)所要爬片的組織塊大小和數(shù)量提供25cm2和75cm2兩種不同規(guī)格長方體瓶身供爬片,能提高爬片的效率。本發(fā)明采用一體式設計,減少了原代細胞提取過程中易發(fā)生的污染的可能性,另外一體式設計也減少了新手或不熟練操作流程實驗員的時間成本和器材消耗。本發(fā)明巧妙的利用纖維網(wǎng)格板,一方面網(wǎng)格板的材質(zhì)是柔性的,不易因形變而碎裂,另一方面不僅可以固定組織塊,網(wǎng)格設計還可以讓培養(yǎng)基滲入,可謂一舉兩得,且網(wǎng)格板孔徑大小可以定制,滿足不同受眾的要求。本公司分離的SD大鼠心肌細胞(乳鼠)取自新鮮的組織材料。吉林哪里有原代細胞購買

常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可以分為兩大類,一類為瞬時轉(zhuǎn)染,一類為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(構(gòu)建穩(wěn)定細胞株)。寧夏C57原代細胞構(gòu)建

導致集中消毒設計的紫外燈無法有效照射內(nèi)部空間,容易滋生細菌,影響細胞培養(yǎng)的存活率。因此,現(xiàn)有技術(shù)存在缺陷,需要改進。技術(shù)實現(xiàn)要素:本實用新型所要解決的技術(shù)問題是:提供一種可存放大量細胞培養(yǎng)皿、空間利用率高、存放方便,具有殺菌消毒作用的新型原代細胞培養(yǎng)箱。本實用新型的技術(shù)方案如下:一種新型原代細胞培養(yǎng)箱,包括若干個用于存放細胞培養(yǎng)皿的內(nèi)箱盒、及用于存放所述內(nèi)箱盒的外箱體,所述外箱體內(nèi)設有若干列中空的矩形槽,各所述矩形槽的兩側(cè)分別設有若干層對稱的滑槽,若干層所述滑槽由上至下等間距依次設置,每一層所述滑槽的正面及背面各存設有一內(nèi)箱盒,所述內(nèi)箱盒包括底盒、紫外燈及上蓋,所述紫外燈設于底盒內(nèi),所述底盒與上蓋的一側(cè)通過合頁鉸接,所述底盒與上蓋的另一側(cè)通過鎖扣扣合連接,所述底盒上設有推拉把手,所述底盒的兩側(cè)分別設有與滑槽適配的滑輪,所述底盒兩側(cè)的頭部分別設有與滑槽適配的滑塊。采用上述技術(shù)方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述滑槽的高度大于滑塊的高度,所述滑塊的高度大于滑輪的直徑。采用上述各個技術(shù)方案,所述的新型原代細胞培養(yǎng)箱中,所述鎖扣包括鎖環(huán)及鎖塊,所述鎖環(huán)與上蓋活動連接,所述鎖塊設于底盒外部。寧夏C57原代細胞構(gòu)建

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