靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關(guān)鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產(chǎn)生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當(dāng)天跑膠,我會(huì)等上層膠凝2個(gè)小時(shí)再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個(gè)小時(shí)的時(shí)候沿著梳子上緣加點(diǎn)電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準(zhǔn)備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內(nèi)槽漏液就不是勻強(qiáng)電場(chǎng)了,條帶可能就不是一條直線。然后內(nèi)槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩?fù)习纬觯缓笥^察泳道內(nèi)有無(wú)脫落的膠粒或者膠絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準(zhǔn)備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會(huì)開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習(xí)慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時(shí)候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來(lái),不然樣品中SDS可能會(huì)結(jié)晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉(zhuǎn)膜1、轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備我會(huì)在電泳結(jié)束0分鐘準(zhǔn)備,把轉(zhuǎn)膜液配好置于4度冰箱預(yù)冷,然后裁膜,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)膜裝置。博萊霉素是具有多種抗腫瘤作用的多組分,其毒副作用之一是引起肺纖維化。兔動(dòng)物模型飼養(yǎng)
角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱:角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2021角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型5周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法:角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴**2滴消毒,以保持結(jié)膜清潔。開瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切,并滴入2滴氯霉素眼**潤(rùn)洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細(xì)眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮,術(shù)畢,滴氯霉素眼**2滴。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明:1、如有特殊要求,請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。北京兔動(dòng)物模型服務(wù)在肝臟中,肝外膽道系統(tǒng)的阻塞會(huì)引發(fā)膽汁淤積和炎癥,導(dǎo)致門靜脈周圍區(qū)域的強(qiáng)烈纖維化反應(yīng)。
脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計(jì)算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無(wú)名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會(huì)自然倒向胸部,防止注射器刺入時(shí)損傷腸道。進(jìn)針的動(dòng)作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準(zhǔn)備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進(jìn)針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉(zhuǎn)針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。【檢測(cè)】肝組織有無(wú):1、肝水腫;2、肝出血;3、炎性細(xì)胞浸潤(rùn);4、肝組織腫大等病理改變。再觀察肝損傷程度,各按程度積分為:0分為無(wú)該項(xiàng)病理改變;1分為病理變化輕且很局限;2分為病理變化中等且局限;3分為病變中等但或局部很;4分為非常的理改變。求出各動(dòng)物的各項(xiàng)病理改變的總和,作為肝損傷程度積分。
輕微的接觸角膜的中心頂端。一通道正極接右眼,二通道正極接左眼。通過(guò)針管對(duì)雙眼滴生理鹽水,改善金環(huán)電極及角膜的接觸效果。保證兩個(gè)金環(huán)電極以相同的角度、方式接觸兩眼角膜中心正端的相同位置。5記錄示波信號(hào)確認(rèn)無(wú)誤后,關(guān)閉暗紅光。可以先嘗試記錄一下暗適應(yīng)光強(qiáng)為·s/m2的erg檢測(cè),確認(rèn)一下信號(hào)的質(zhì)量:如果雙眼的振幅出現(xiàn)了與預(yù)期不同的較大差異,建議再次檢查金環(huán)電極的安裝位置。然后依次記錄暗適應(yīng)光強(qiáng)為·s/m2的信號(hào)。需要注意的是,完成暗適應(yīng)·s/m2光強(qiáng)檢測(cè)后,系統(tǒng)將自動(dòng)打開背景光。同樣的,需要打開定時(shí)器,光適應(yīng)10-15分鐘,再記錄。6經(jīng)過(guò)光適應(yīng)后,依次記錄光適應(yīng)·s/m2以及·s/m2光強(qiáng)下波形,記錄·s/m2光強(qiáng)下閃爍視網(wǎng)膜誘發(fā)電位。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在4個(gè)月時(shí),與ctrl(對(duì)照)小鼠比較,cko(gm20541基因敲除純合子小鼠)小鼠的a波和b波在暗適應(yīng)和光適應(yīng)條件下均明顯降低,表明gm20541敲除后導(dǎo)致視力受損(見圖5和圖6)。實(shí)施例4視網(wǎng)膜石蠟切片h&e染色:對(duì)4月齡小鼠的視網(wǎng)膜進(jìn)行石蠟切片、蘇木精-伊紅染色法(h&e染色方法)染色,具體操作如下:1)快速取小鼠眼球組織,并置于固定液中固定24h;2)石蠟包埋,切片,厚度為4μm;3)切片常規(guī)用二甲苯脫蠟。控制原發(fā)病,遏制其誘導(dǎo)的全身失控性炎癥反應(yīng),是預(yù)防和ALI/ARDS的必要措施。
視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關(guān)細(xì)胞層出現(xiàn)相應(yīng)病理改變。因此,視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中的gm20541基因被敲除的動(dòng)物可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病研究等領(lǐng)域中,為該疾病的研究例如發(fā)病過(guò)程、機(jī)制以及相關(guān)藥物的篩選提供一種新的模型。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中,敲除gm20541基因序列是指敲除gm20541基因的外顯子序列。敲除gm20541基因序列可以是敲除gm20541基因全長(zhǎng)序列,也可以是敲除gm20541基因部分序列例如部分外顯子序列,無(wú)論敲除那種類型(部分或全長(zhǎng))的序列,只要是能夠在前體細(xì)胞中沉默gm20541基因的表達(dá),使動(dòng)物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病相應(yīng)特征即落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中,所述外顯子序列選自第1外顯子、第2外顯子、第3外顯子中的任意一個(gè)或多個(gè)外顯子序列。在本發(fā)明公開的內(nèi)容基礎(chǔ)上,即在本發(fā)明揭示了gm20541基因與視網(wǎng)膜色素變性疾病的相關(guān)關(guān)系的前提下,本領(lǐng)域技術(shù)人員容易想到敲除gm20541基因的任意一個(gè)或多個(gè)外顯子序列,以使gm20541基因的功能受損,進(jìn)而得到類似的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,此類方法,也是屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中。建立SD大鼠頸動(dòng)脈損傷(結(jié)扎套管)模型。兔動(dòng)物模型飼養(yǎng)
脂多糖(LPS)聯(lián)合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。兔動(dòng)物模型飼養(yǎng)
用一次定量放血法可擺分之?dāng)[造成出血性休克,擺分之?dāng)[死亡,這就符合可重復(fù)性和達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)化要求。(三)可靠性復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病,即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化,應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗(yàn)或X線照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動(dòng)物,就不應(yīng)加以選用,易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。(四)適用性和可控性供醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究用的動(dòng)物模型,在復(fù)制時(shí),應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利于研究的開展。(五)易行性和經(jīng)濟(jì)性在復(fù)制動(dòng)物模型時(shí),所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)條件原則。以上就是上海研錄為你分享的小知識(shí),如果想要了解更多相關(guān)內(nèi)容,可與我們聯(lián)系,我們期待您的來(lái)電!兔動(dòng)物模型飼養(yǎng)