導語原代細胞培養也叫初代培養，是建立細胞系的步，其步驟包括取材→分離→培養和維持，給大家帶來原代細胞培養的一些技巧，希望大家能有所收獲！原代細胞培養原代細胞培養的應用1、為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；2、為傳代培養創造條件；3、服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。原代細胞培養之取材取材作為原代細胞培養過程中的部至關重要，以下幾種取材技術，你都用過哪些方法呢？兔髓核原代細胞培養之分離注意事項1、組織塊培養法1）組織塊接種后的天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2）加入的培養液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3）當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產生的有毒物質會影響原代細胞的生長。4）為促進組織塊盡快粘貼在培養瓶皿上，可以在種植前先將膠原薄層涂在培養瓶底壁上。2、貼壁型原代細胞1)原代培養的分離細胞在初次接觸體外環境時，它們之間會互相影響，在這些細胞之間能產生一些促生長的活性物質，使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低。血管疾病發生和發展的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞轉變成為了具有繁殖能力的表型。兔原代細胞分離

是決定培養能否成功的關鍵。可以在接種后先將培養瓶置培養箱內培養3h到5h，待細胞貼壁后，再補足培養液繼續培養。3、懸浮型原代細胞1）必須保持細胞的懸浮狀態。可以通過增加培養液的黏度來幫助細胞呈懸浮狀態，如給培養液中加入低濃度的透明質酸復合物。在有攪拌裝置的培養器皿內加入培養液是，以5ml為限度，否則攪拌時會產生氣泡對細胞造成傷害。使用這種方式需注意勿使攪拌速度過快，否則即可使培養液溢出又容易造成污染。如果培養液的量在5ml以下，可以采用旋轉瓶培養。給懸浮培養的細胞換液時要注意不要吸出細胞。2）能夠進行懸浮培養的細胞，其生命力一般都比較旺盛，體外分裂增殖的速度較快，營養成分消耗大，換液時間隔一般較短。原代細胞培養問題解答1、原代細胞與細胞系有什么區別？根據傳統定義，收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney,.(1987)..(NewYork,.)].這類細胞直接從組織分離，生命周期有限，經數次傳代后會逐漸停止生長。原代細胞在有限的生命周期內需掌握好細胞的生長空間，以保持細胞群中基因型和表型的一致性。細胞系是不斷生長、分化的細胞群，因其經過遺傳改造，致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫療或科研。但實際上。西藏疾病模型原代細胞服務多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長。

導致集中消毒設計的紫外燈無法有效照射內部空間，容易滋生細菌，影響細胞培養的存活率。因此，現有技術存在缺陷，需要改進。技術實現要素：本實用新型所要解決的技術問題是：提供一種可存放大量細胞培養皿、空間利用率高、存放方便，具有殺菌消毒作用的新型原代細胞培養箱。本實用新型的技術方案如下：一種新型原代細胞培養箱，包括若干個用于存放細胞培養皿的內箱盒、及用于存放所述內箱盒的外箱體，所述外箱體內設有若干列中空的矩形槽，各所述矩形槽的兩側分別設有若干層對稱的滑槽，若干層所述滑槽由上至下等間距依次設置，每一層所述滑槽的正面及背面各存設有一內箱盒，所述內箱盒包括底盒、紫外燈及上蓋，所述紫外燈設于底盒內，所述底盒與上蓋的一側通過合頁鉸接，所述底盒與上蓋的另一側通過鎖扣扣合連接，所述底盒上設有推拉把手，所述底盒的兩側分別設有與滑槽適配的滑輪，所述底盒兩側的頭部分別設有與滑槽適配的滑塊。采用上述技術方案，所述的新型原代細胞培養箱中，所述滑槽的高度大于滑塊的高度，所述滑塊的高度大于滑輪的直徑。采用上述各個技術方案，所述的新型原代細胞培養箱中，所述鎖扣包括鎖環及鎖塊，所述鎖環與上蓋活動連接，所述鎖塊設于底盒外部。

收藏查看我的收藏0有用+1已投票0細胞培養編輯鎖定本詞條由“科普中國”科學百科詞條編寫與應用工作項目審核。細胞培養（cellculture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個必不可少的過程，細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技術，通過細胞培養既可以獲得大量細胞，又可以借此研究細胞的信號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。[1]中文名細胞培養外文名cellculture別名細胞克隆術語細胞培養技術地位生物技術中基礎的技術常用培養基無鈣、鎂、離子溶液目錄1分類2環境及條件?環境因素?營養條件3設施器材4一般過程5具體步驟6注意事項細胞培養分類編輯動物細胞培養高速冷凍離心機在所有的細胞離體培養中，困難的是動物細胞培養。臍帶是哺乳類連接胎兒和胎盤的管狀結構。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈。

⑦實驗完畢及時收拾，保持工作區域清潔整齊，用75%酒精清潔臺面。（3）細胞污染的預防①實驗用品防止污染。細胞培養所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要徹底，各種溶液滅菌要仔細，并在無菌實驗檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。②操作過程防止污染。③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進入細胞間。④實驗開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全柜之外的物品，必須及時對手套進行消毒。⑤進入細胞培養間后關好門，坐下來盡量少走動以免影響生物安全柜的風簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴格檢查所用的器材、溶液和細胞，不要把污染品或未經消毒的物品帶入無菌室內，更不能隨便使用，以免造成大規模污染。⑥細胞操作時動作要輕，必須在火焰周圍無菌區內打開瓶口，并將瓶口放在火焰周圍簡單轉動燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。⑦實驗操作時生物安全柜的隔板要盡可能放低，盡量減少談話，打噴嚏或咳嗽時不能對著工作區，以免造成不必要的污染。⑧瓶蓋應當倒放在遠離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。⑨不要從敞開的容器口上方經過。干細胞的誘導分化一方面是干細胞鑒定的主要方法。西藏模式原代細胞分離

HUVSMC(人臍靜脈血管平滑肌細胞)。兔原代細胞分離

4、凍存的細胞該如何開始培養？(1)將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。(2)將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉，直到管內物體完全融化。(3)將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉入無菌環境。(4)用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。(5)打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負壓，開蓋時可能會有少量溢出，這是正常現象）。(6)用多聚賴氨酸（或參照說明書）包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。(7)蓋好培養瓶的蓋子，輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。(8)將培養瓶放入培養箱中（37℃，5%CO2，95%空氣）(9)放入培養箱后第6-16小時更換一次培養基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。5、細胞培養過程中，多久更換一次培養基？這取決于細胞生長的速度。一般而言2-3天更換一次培養基，許多細胞培養實驗室通常在周一，周三，周五更換培養基。注意：凍存細胞復蘇后，在6-16小時內更換培養基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細胞。6、我能擴增培養和再次凍存原代正常人類細胞嗎？這取決于細胞的類型。一些細胞類型像神經細胞，神經膠質細胞和一些生長緩慢的上皮細胞。兔原代細胞分離