取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;高質量的土壤DNA提取,保證您的實驗結果。嘉定區土壤微生物DNA土壤DNA提取參數
土壤,MP試劑盒都可以提取到高產量的DNA核酸。訂購信息:貨號:11**60*00、11**6**00、11***0*00。名稱:FastDNATM SPIN Kit For Soil(2ml)、FastDNATM SPIN Kit For Soil(2ml)、FastDNATM SPIN Kit For Soil(50ml)。規格:5次、50次、10次。經典一路陪伴您-土壤DNA提取試劑盒!FastDNATM SPIN土壤試劑盒。FastDNA? SPIN土壤試劑盒(貨號:1Z***56**00)在30分鐘內可以從土壤、灰泥等復雜環境樣本中高效提取全部微生物的總DNA。與MP FastPrep黃浦區土壤DNA土壤DNA提取代理價土壤DNA提取的報價具體是多少呢?
取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘; b.最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻; c.將上一步的混合液轉移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴增及電泳 將上步純化的DNA進行PCR擴增,在電泳儀中檢測DNA。 本發明具有以下有益效果: 本發明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液、結合液、漂洗液、洗脫液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入結合液之前,樣品土壤來源的二氧化硅不與DNA結合,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入結合液,混合后轉入含有硅基DNA吸附材料中,分離液體和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫獲得純化DNA;
如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次。【2】減少樣本用量。問題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數。·洗滌不干凈:增加洗滌次數。問題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加。在線詢問土壤DNA提取價格,規格。
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