膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關注的是采用的超濾膜及設備對目標蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產品成為優先的**技術關鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質的 吸附對樣品收率會產生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應該考慮采用較小的設備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應該選 用膜面積小的裝置,同時保證一定的流速。默克密理博設計了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統,支持您獲得理想的處理效果。您了解超濾濃縮管的優勢嗎?無錫默克0.5ml超濾濃縮管商家
蛋白親和純化(無需換液和濃縮) * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優化。 3次低速離心,總耗時~75分鐘(含60分鐘孵育時間) 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹脂(沉降的柱床體積)和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹脂。(柱床)樹脂量≥ 500μL時采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹脂吸打混勻。孵育1 h*,其間可溫和攪動促進結合。寶山區默克4ml超濾濃縮管報價超濾濃縮管的好處您了解多少呢?
加入漂洗緩沖液(體積是樹脂柱床體積的7.5倍)并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。 4. 使用一個新的50 mL離心管作為收集管。 5. 加入洗脫緩沖液(體積是樹脂柱床體積的5倍)與樹脂混勻并離心。< 500μL樹脂時1,000×g離心1 min;≥ 500μL樹脂時2,000×g離心4 min。回收管中即純化好的蛋白。 6. 如果是純化抗體,在純化產物中加入中和緩沖液。 * 進行較大體積操作時,可以延長結合反應時間,并用膠帶密封上樣池上沿以便顛倒混勻操作。離心前去除膠帶即可。選購不帶Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管的Amicon? Pro時請使用目錄號ACS500024。
Millipore超濾濃縮管設有反轉離心回收設計使蛋白樣品,特別是小體積樣品回收,避免吸頭吸取造成的樣品丟失或操作錯誤; 其中0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設計為反轉回收模式樣品吸附損失??; 合理的死體積設計,避免樣品離干而降低回收率; 能兼顧高回收率和操作的方便性及標準化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕松。 有效濃縮同時保證高的蛋白回收率 設計精巧、緊湊,一體化結構確保不會發生滲漏,即使是極為珍貴的樣品也能非常放心地操作。超濾濃縮管的系列有很多種。
默克密理博 Amicon? Ultra 離心式超濾管因其完美的設計 一經推出即成為生物樣品操作的行業頭牌產品。不論是蛋白、 核酸、***或顆粒物,抑或低濃度樣品或寶貴的活性樣品, Amicon? Ultra 都能兼顧高回收率和操作的方便性及標準 化,并滿足下游各種應用的要求,使研究者處理樣品時倍感輕 松。 Amicon? Ultra 超濾管的獨特優點: 有效濃縮同時保證比較高的蛋白回收率 合理的死體積設計 ?避免樣品離干而降低回收率 ?便于估計和控制樣品濃縮倍數 ?重復性好,便于樣品數據相互比較買超濾濃縮管找益啟生物公司。無錫默克0.5ml超濾濃縮管商家
超濾濃縮管的好處有很多。無錫默克0.5ml超濾濃縮管商家
操作模式 常規與切向流 : 常規溶液過濾(NFF)中液體在壓力或真空驅動下直接流 過膜。大的顆粒物被膜截留并堆積在膜上,小分子則通過膜流出。NFF 常 用于無菌過濾、澄清預過濾及*** / 蛋白樣品制備等。切向流過濾(TFF) 液體流過時與膜表面呈一定角度,被膜阻擋的大顆粒物不會累積在膜表 面,而且還會被切向流從膜表面掃除,因此 TFF 成為按分子大小不同分離 的主流方法。TFF 在大體積樣品處理中是主要的操作方法,而現在,TFF 技術被用于 Amicon? Ultra 離心式超濾管的設計中,使小體積樣品的濃縮 和分離操作也變得更加方便。無錫默克0.5ml超濾濃縮管商家