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來源: 發(fā)布時間:2025-10-13

該系統(tǒng)為電子探針分析提供具有足夠高的入射能量,足夠大的束流和在樣品表面轟擊殿處束斑直徑近可能小的電子束,作為X射線的激發(fā)源。為此,一般也采用鎢絲熱發(fā)射電子槍和2-3個聚光鏡的結(jié)構(gòu)。 為了提高X射線的信號強度,電子探針必須采用較掃描電鏡更高的入射電子束流(在10-9-10-7A范圍),常用的加速電壓為10-30 KV,束斑直徑約為0.5μm。電子探針在鏡筒部分與掃描電鏡明顯不同之處是由光學(xué)顯微鏡。它的作用是選擇和確定分析點。其方法是,先利用能發(fā)出熒光的材料(如ZrO2)置于電子束轟擊下,這是就能觀察到電子束轟擊點的位置,通過樣品移動裝置把它調(diào)到光學(xué)顯微鏡目鏡十字線交叉點上,這樣就能保證電子束正好轟擊在分析點上,同時也保證了分析點處于X射線分光譜儀的正確位置上。在電子探針上大多使用的光學(xué)顯微鏡是同軸反射式物鏡,其優(yōu)點是光學(xué)觀察和X射線分析可同時進行。放大倍數(shù)為100-500倍。可以進行點、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。靜安區(qū)特制探針商家

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缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法,反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I(DNase I)、大腸桿菌DNA聚合酶I(DNA polymerase I)、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸(如dATP、dTTP、dCTP,”P—dGTP),其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機切開若干個缺口(不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓缓笤俳柚贒NA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性,切去5’末端的核苷酸;同時又利用該酶的5’→3’聚合酶活性,使32P標(biāo)記的互補核苷酸補入缺口.DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用,使缺口不斷向3’的方向移動,DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)記的核苷酸所取代。由于反應(yīng)體系中含有同位素標(biāo)記的單核苷酸,使新合成的鏈帶有同位素標(biāo)記,所以缺口平移實際上是同位素標(biāo)記的核苷酸取代了原DNA鏈中不帶同位素的同種核苷酸。浦東新區(qū)品牌探針商家掃描電子探針儀是美國于1960年制成,不僅能對試樣作點或微區(qū)分析,而且能對樣品表面微區(qū)進行掃描。

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特異性探針有三種形式——cDNA、RNA、寡核苷酸。cDNA和寡核苷酸是**常采用的探針。RNA探針用途很廣,也容易獲得,但其不穩(wěn)定性限制了其商業(yè)用途。cDNA探針的獲得是,將特定的基因片段裝載到質(zhì)粒或噬菌體中,經(jīng)過擴增、酶切、純化等復(fù)雜的步驟,才能得到一定長度的cDNA探針。這一過程比較復(fù)雜,有相應(yīng)條件的實驗室才能做到。寡核苷酸探針是在已知基因序列的情況下,由核酸合成儀來完成,可廉價獲得大量的此類探針。質(zhì)量也相對來說更為穩(wěn)定。由于cDNA探針長度通常為數(shù)百至數(shù)千個堿基,所以有良好的信號放大作用,但其滲透性比較差。寡核苷酸探針一般為十?dāng)?shù)個至數(shù)十個堿基,滲透性強,但信號放大作用則較差,合成的多相寡核苷酸探針,敏感性可以達到cDNA探針?biāo)健?/p>

DNA探針可以用來診斷寄生蟲病,現(xiàn)場調(diào)查及蟲種鑒定,可用于病毒性肝炎的診斷,遺傳性疾病的診斷,可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法:用一個特定的DNA片段制成探針,與被測的病毒DNA雜交,從而把病毒檢測出來。與傳統(tǒng)方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統(tǒng)的檢測一次,需幾天或幾個星期的時間,精確度不高,而用DNA探針只需一天。據(jù)報道,能從1t水中檢測出10個病毒來,精確度**提高。RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應(yīng)效率極高。利用特征波長來確定元素的儀器叫做波長色散譜儀(波譜儀),利用特征能量的就稱為能量色散譜儀(能譜儀)。

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用此探針在DNA文庫中篩選,陽性克隆即是目標(biāo)蛋白的編碼基因。值得一提的是真核細胞和原核細胞DNA組織有所不同。真核基因中含有非編碼的內(nèi)含子序列,而原核則沒有。因此,真核基因組DNA探針用于檢測基因表達時雜交效率要明顯低于cDNA探針。DNA探針(包括cDNA探針)的主要優(yōu)點有下面三點:①這類探針多克隆在質(zhì)粒載體中,可以無限繁殖,取之不盡,制備方法簡便。②DNA探針不易降解(相對RNA而言),一般能有效抑制DNA酶活性。③DNA探針的標(biāo)記方法較成熟,有多種方法可供選擇,如缺口平移,隨機引物法,PCR標(biāo)記法等,能用于同位素和非同位素標(biāo)記。波譜儀的關(guān)鍵在于怎樣實現(xiàn)將未知的特征譜線與已知元素Z聯(lián)系起來?靜安區(qū)特制探針商家

還能全自動進行批量(預(yù)置9999測試點)定量分析。靜安區(qū)特制探針商家

電子探針是運用電子所形成的探測針(細電子束)作為X射線的激發(fā)源來進行顯微X射線光譜分析的儀器。分析對象是固體物質(zhì)表面細小顆粒或微小區(qū)域,**小范圍直徑為1μm。電子探針可測量的化學(xué)成分的元素范圍一般從原子序數(shù)12(Mg)至92(U),原子序數(shù)大于22的元素可在空氣通路的X射線光譜儀上進行測量。電子探針的靈敏度低于X射線熒光光譜儀,原因是電子探針X射線的本底值高于后者,但電子探針的***感量比其他儀器都高。此外,后期生產(chǎn)的儀器,可作X射線背散射照相、******照相。能兼作透射電鏡、能進行電子衍射、能作電子熒光觀察等。靜安區(qū)特制探針商家

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