·應(yīng)用:o糖尿病診斷與分型(胰島素、C肽)。o甲狀腺功能評估(TSH,FreeT3,FreeT4-后者常用化學(xué)發(fā)光)。o生殖內(nèi)分泌(LH,FSH,E2,P,PRL,睪酮)。o腎上腺功能評估(皮質(zhì)醇、ACTH)。o骨質(zhì)疏松相關(guān)(PTH,25-OHVitD)。o生長發(fā)育評估(GH,IGF-1)。·優(yōu)勢:靈敏度能滿足多數(shù)***檢測需求;特異性好(尤其使用單克隆抗體);高通量;成本適中。·挑戰(zhàn):o***存在結(jié)合蛋白(如皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白CBG,性***結(jié)合球蛋白SHBG),影響游離(有活性)***的檢測。一些ELISA檢測總***,一些則需專門方法測游離***。o***分泌有節(jié)律性(如皮質(zhì)醇的晝夜節(jié)律),采樣時間需標(biāo)準(zhǔn)化。o類固醇***結(jié)構(gòu)相似,抗體交叉反應(yīng)可能導(dǎo)致干擾。高靈敏度和特異性要求抗體質(zhì)量極高。o臨床主流正逐漸轉(zhuǎn)向自動化程度更高、靈敏度更優(yōu)的化學(xué)發(fā)光免疫分析(CLIA)。血清樣本需避免反復(fù)凍融以保證抗體活性。山東魚ELISA試劑盒
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)技術(shù)在食品安全檢測領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用,尤其適用于農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、非法添加劑及生物***等有害物質(zhì)的快速篩查。針對不同食品基質(zhì)的檢測需求,市場上已開發(fā)出多種高靈敏度和高特異性的 ELISA 試劑盒,如牛奶中的三聚氰胺、肉類中的瘦肉精(如克倫特羅、萊克多巴胺)、水產(chǎn)品中的孔雀石綠、糧食中的黃曲霉***等。這些試劑盒通常采用競爭法或間接法檢測原理,通過抗原-抗體的特異性結(jié)合反應(yīng),實現(xiàn)對目標(biāo)物的定量或半定量分析。吉林哪里有ELISA試劑盒部分ELISA試劑盒可檢測磷酸化蛋白修飾水平。
間接法(IndirectELISA)主要用于檢測樣品中特異性抗體的存在和含量(如血清學(xué)檢測抗體滴度、篩選單克隆抗體)。其**步驟如下:1.包被抗原:將已知的純化抗原(如病毒蛋白、重組蛋白)固定在微孔板孔底(試劑盒中可能已包被)。2.封閉:封閉剩余位點。3.加樣:加入待測血清或抗體樣品(一抗),如果樣品中含有特異性抗體,則與包被抗原結(jié)合。4.洗滌:洗去未結(jié)合的一抗。5.加二抗:加入酶標(biāo)記的抗抗體(二抗,如酶標(biāo)羊抗人IgG、酶標(biāo)兔抗鼠IgG)。二抗能特異性識別并結(jié)合一抗的Fc段。6.洗滌:洗去未結(jié)合的二抗。7.加底物顯色:加入酶的底物進行顯色反應(yīng)。8.終止與讀數(shù)。信號強度與樣品中特異性抗體的含量成正比。間接法的優(yōu)勢在于使用一種酶標(biāo)二抗可以檢測多種不同來源的一抗(只要二抗能識別),靈活性高,成本相對較低。缺點是可能受類風(fēng)濕因子等干擾物質(zhì)影響,且信號放大程度不如夾心法。
環(huán)境污染物對生態(tài)系統(tǒng)和人類健康構(gòu)成威脅。ELISA作為一種快速靈敏的現(xiàn)場篩查工具,在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用:·檢測對象:o農(nóng)藥殘留:檢測土壤、水體(地表水、地下水)、農(nóng)產(chǎn)品中殘留的有機磷、有機氯、三嗪類、擬除蟲菊酯等農(nóng)藥。常用競爭法ELISA試劑盒。o獸藥殘留:監(jiān)測養(yǎng)殖場廢水、地表水中***(如磺胺類、四環(huán)素類)和***殘留。o生物***:檢測水體(尤其是藻華期間)中的微囊藻***(Microcystins)、石房蛤***(Saxitoxin)等藻***;檢測糧食、飼料中的******污染。o重金屬:雖然ELISA不直接檢測金屬離子,但可開發(fā)針對重金屬離子(如汞Hg2?、鎘Cd2?)螯合復(fù)合物的競爭法ELISA,或檢測重金屬誘導(dǎo)產(chǎn)生的特異性蛋白(如金屬硫蛋白)。o環(huán)境***(內(nèi)分泌干擾物):檢測雙酚A(BPA)、烷基酚、鄰苯二甲酸酯類等具有雌***活性的化合物。競爭法。o病原微生物指示物:檢測水體中大腸桿菌等糞便污染指示菌的特異性抗原。·應(yīng)用場景:污染源調(diào)查、環(huán)境質(zhì)量例行監(jiān)測、突發(fā)污染事件應(yīng)急響應(yīng)、污水處理廠出水監(jiān)測、飲用水安全篩查。某些病毒抗原檢測需在BSL-2實驗室操作。
細胞因子(Cytokines)和趨化因子(Chemokines)是免疫細胞和多種組織細胞分泌的小分子蛋白(多肽),在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、造血、細胞生長分化等生理病理過程中扮演關(guān)鍵信使角色。研究其表達譜和動態(tài)變化對于理解免疫機制、疾病發(fā)***展至關(guān)重要。ELISA是檢測特定細胞因子/趨化因子蛋白濃度的金標(biāo)準(zhǔn)方法。·檢測對象:血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織裂解液等樣本中的可溶性細胞因子/趨化因子(如IL-1β,IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,TNF-α,IFN-γ,MCP-1,IL-8)。·技術(shù)選擇:夾心法ELISA**為常用,因其對復(fù)雜樣本中低豐度細胞因子的檢測具有高靈敏度和特異性。需要高親和力、高特異性的配對抗體。·應(yīng)用場景:o基礎(chǔ)免疫研究:分析不同刺激條件(病原體、藥物)下免疫細胞分泌的細胞因子譜。o疾病機制研究:研究***性疾病(如膿毒癥)、自身免疫病、過敏性疾病、**微環(huán)境中細胞因子的作用。o生物***藥物研發(fā)與評估:檢測***性抗體或細胞因子藥物在體內(nèi)的水平和藥效。o臨床診斷與監(jiān)測:某些細胞因子(如IL-6在細胞因子風(fēng)暴)可作為疾病嚴(yán)重程度或預(yù)后的指標(biāo)。檢測范圍過窄可能導(dǎo)致樣本需要多次稀釋。山東魚ELISA試劑盒
96孔板設(shè)計可實現(xiàn)高通量樣本并行檢測。山東魚ELISA試劑盒
**標(biāo)志物(TumorMarkers)是指由腫瘤細胞本身產(chǎn)生或由機體對**反應(yīng)而產(chǎn)生的、可存在于血液、體液或組織中的生物分子。ELISA是檢測循環(huán)**標(biāo)志物(血清/血漿)**常用的技術(shù)之一,用于:·輔助診斷:某些標(biāo)志物升高提示特定**存在的可能性(需結(jié)合影像學(xué)、病理學(xué)確診)。例如:o甲胎蛋白(AFP):原發(fā)性肝細胞*、生殖細胞**。o*胚抗原(CEA):結(jié)直腸*、胃*、胰腺*、肺*、乳腺*等(廣譜但特異性不高)。o前列腺特異性抗原(PSA):前列腺*篩查(爭議較大)及***后監(jiān)測。o糖類抗原CA125:卵巢*。o糖類抗原CA15-3:乳腺*。o糖類抗原CA19-9:胰腺*、膽管*。山東魚ELISA試劑盒