自身免疫病的特征是機體免疫系統錯誤地攻擊自身組織。檢測血清中的自身抗體是診斷、分型、評估疾病活動度和預后的重要手段。ELISA因其高通量和定量能力,成為檢測自身抗體的優先方法之一?!こR姍z測靶點:o抗核抗體(ANA):篩查系統性紅斑狼瘡(SLE)等結締組織病。ELISA可檢測針對特定核抗原(如dsDNA,Sm,RNP,SSA/Ro,SSB/La,Scl-70,Jo-1)的特異性抗體。o類風濕因子(RF):檢測針對自身IgGFc段的抗體,與類風濕關節炎(RA)相關(但也見于其他疾病和健康老人)。o抗環瓜氨酸肽抗體(Anti-CCP):對RA診斷特異性高。o抗中性粒細胞胞漿抗體(ANCA):如c-ANCA(抗PR3,韋格納肉芽腫)、p-ANCA(抗MPO,顯微鏡下多血管炎)。o抗磷脂抗體(aPL):如抗心磷脂抗體(aCL)、抗β2糖蛋白I抗體(anti-β2GPI)、狼瘡抗凝物(LA),與抗磷脂綜合征(APS)相關。o***特異性抗體:如抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)、抗甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)(橋本甲狀腺炎);抗谷氨酸脫羧酶抗體(GADAb)、抗胰島細胞抗體(ICA)(1型糖尿?。?;抗組織谷氨酰胺轉移酶抗體(tTG-IgA)(乳糜瀉)。ELISA試劑盒是一種基于酶聯免疫吸附原理的高靈敏度檢測工具。西藏國產ELISA試劑盒電話多少
顯色反應是將酶催化轉化為可檢測信號的關鍵步驟,需要精確控制?!さ孜餃蕚洌喊凑f明書要求配制或平衡底物溶液(TMB通常需平衡至室溫,避免低溫影響反應速率)。避光保存(尤其TMB對光敏感)。確保底物新鮮,無沉淀或變色?!ぜ拥孜铮菏褂枚嗤ǖ酪埔浩骰蚺?**快速、均一地向所有孔加入等量底物(避免產生氣泡)。記錄準確的加底物時間點,因為反應是動態進行的?!け芄夥跤簩⑽⒖装逯糜诎堤帲ɑ蛏w上避光蓋)按說明書要求的時間(通常5-30分鐘)和溫度(通常是室溫或37°C)進行孵育。顯色時間對結果影響很大,時間過短信號弱,時間過長可能飽和或背景升高。如需精確控制,可設置定時器?!そK止反應:當陽性對照孔顯色達到預期(如TMB顯藍色,標準曲線梯度明顯)或達到預定時間時,立即按相同順序和速度向每孔加入終止液(如HRP-TMB系統用1M或2MH?SO?)。終止液會改變pH,使酶失活并穩定顏色(如TMB變黃)。加入終止液后,顏色會迅速變化并穩定下來(但仍建議盡快讀數)。·讀數窗口:終止后,應在說明書規定的時間內(通常5-30分鐘內)完成吸光度讀數。放置時間過長,顏色可能緩慢褪去或沉淀,影響準確性。黑龍江犬ELISA試劑盒銷售電話ELISA試劑盒的保存條件通常為2-8℃避光。
ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒基于抗原-抗體特異性結合的免疫學原理,通過酶促反應放大信號實現目標分子的定量或定性檢測。其**組件包括固相載體(如聚苯乙烯微孔板)、酶標抗原/抗體及底物系統。實驗中,抗原或抗體被吸附于固相載體表面,與樣本中的目標分子結合后,通過酶標記的二抗或抗原形成復合物,催化底物產生顏色變化。顏色深淺與目標分子濃度呈正相關,通過吸光度(OD值)測定即可實現精細分析。這一技術因其高靈敏度、強特異性和操作便捷性,已成為生物醫學研究、臨床診斷及藥物開發中不可或缺的工具。
ELISA技術歷經數十年發展仍被廣泛應用,歸功于其***的優點:1.高靈敏度:通過酶促反應放大信號,可檢測皮克(pg/mL)甚至飛克(fg/mL)級別的目標分子,遠高于許多傳統生化方法。2.高特異性:基于抗原-抗體高度特異的結合反應,尤其是使用單克隆抗體的夾心法,能有效區分結構相似的分子。3.高通量:96孔板(或更多孔)的設計允許同時處理大量樣品和標準品,結合自動化設備(移液工作站、洗板機、酶標儀),非常適合大規模篩查和批量檢測。4.相對簡便快速:試劑盒化使得操作流程標準化,無需復雜設備(基礎實驗室配備移液器、孵育箱、洗板設備、酶標儀即可),實驗時間通常在幾小時內完成。5.可定量:通過標準曲線可實現目標物的精確定量分析。6.應用范圍極其***:可檢測幾乎所有類型的生物分子(蛋白質、多肽、***、抗體、病原體抗原、小分子半抗原等),樣本來源多樣(血清、血漿、細胞上清、組織裂解液、尿液等)。7.成本效益相對較高:與質譜、測序等更高級技術相比,儀器和試劑成本較低,單個樣本檢測成本可控。8.結果可視化/客觀化:顯色反應肉眼可見(定性),吸光度讀數提供客觀數據。實驗時需穿戴防護裝備避免接觸終止液等腐蝕性試劑。
隨著移動醫療技術的進步,智能手機與微型ELISA裝置的結合為家庭自測提供了新思路。例如,用戶可通過手機攝像頭拍攝試紙條的顯色結果,配合**APP進行圖像分析(如RGB值測量),實現半定量檢測。部分研究團隊還開發了便攜式微流控ELISA芯片,*需一滴血或唾液即可完成檢測,并通過藍牙將數據傳輸至手機,便于遠程醫療咨詢。這類技術特別適用于慢性病監測(如糖尿病、心血管標志物檢測)和傳染病篩查(如流感、HIV自檢),有望降低醫療成本并提高疾病管理的便捷性。樣本預處理可減少基質效應對檢測的干擾。福建推薦ELISA試劑盒單價
心肌肌鈣蛋白ELISA試劑盒用于急性心梗診斷。西藏國產ELISA試劑盒電話多少
雙抗體夾心法(SandwichELISA)是**常用、**靈敏的ELISA類型,特別適用于定量檢測大分子抗原(如細胞因子、***、病毒蛋白、可溶性受體等),要求目標抗原至少具有兩個不同的、空間上不重疊的表位。其**步驟如下:1.包被:將特異性捕獲抗體固定在微孔板孔底(試劑盒中已完成)。2.封閉:加入封閉液封閉剩余位點(通常已完成)。3.加樣:加入待測樣品或標準品,目標抗原被捕獲抗體特異性結合。4.洗滌:洗去未結合的樣品成分。5.加檢測抗體:加入酶標記的特異性檢測抗體(識別抗原的另一表位),形成“固相捕獲抗體-抗原-酶標檢測抗體”三明治復合物。6.洗滌:洗去未結合的酶標檢測抗體。7.加底物:加入酶的顯色底物,酶催化反應產生顏色(或光/熒光)。8.終止與讀數:加入終止液(如為HRP-TMB系統)停止反應,在特定波長(如450nm)下讀取吸光度(OD值)。信號強度與樣品中抗原濃度成正比。此模式特異性高,因為需要兩個抗體的雙重識別。西藏國產ELISA試劑盒電話多少